昆虫学报杂志

昆虫学报杂志2026年第2期

• 褐飞虱味觉受体基因NlugGR17的克隆、表达谱与功能鉴定

  钟雨晴,纵雯,申屠旭萍,俞晓平,刘一鹏

  【目的】褐飞虱Nilaparvata lugens是危害全球水稻安全生产的重要害虫,对褐飞虱关键味觉受体(gustatory receptor, GR)基因进行功能鉴定对发展新型绿色防控技术具有重要意义。本研究旨在克隆褐飞虱成虫触角中高表达的味觉受体基因NlugGR17，明确其序列特征与表达模式，并探究该基因在褐飞虱生存中的作用，为靶向味觉受体的害虫防控策略提供理论依据。【方法】基于褐飞虱成虫触角转录组数据克隆NlugGR17的cDNA全长序列；利用生物信息学工具分析NlugGR17跨膜结构域及系统进化关系；采用实时定量PCR(quantitative real-time PCR, qRT-PCR)技术检测NlugGR17在褐飞虱 1-5龄若虫和雌雄成虫触角及雌雄成虫足中的表达量；通过RNA干扰(RNA interference, RNAi)技术沉默NlugGR17表达，检测RNAi后褐飞虱雌雄成虫体内NlugGR17表达量变化，观察统计RNAi后褐飞虱成虫存活率。【结果】成功克隆获得NlugGR17 cDNA全长序列，其编码蛋白包含6个跨膜结构域。系统发育分析显示，NlugGR17与已知昆虫糖受体聚为一支。qRT-PCR结果表明，NlugGR17在褐飞虱1-5龄若虫和雌雄成虫触角中均有表达，且雌雄成虫触角中的表达量显著高于1-5龄若虫触角中的; 在雌雄成虫足中微弱表达。RNAi实验结果显示，通过RNAi敲降NlugGR17可导致褐飞虱雌雄成虫存活率比注射dsNlugGFP的对照组显著下降。【结论】NlugGR17是褐飞虱生存所必需的味觉受体基因，可能参与糖类识别与能量代谢过程，具有作为褐飞虱行为调控防治技术研发分子靶标的潜力。

• 瓜实蝇黏连蛋白复合体亚基基因Zcsolo和Zcsunn的克隆、表达谱和功能分析

  金倩倩,马卢杰,林先武,颜日辉

  【目的】鉴定并探究黏连蛋白复合体(cohesin complex)亚基ZcSOLO和ZcSUNN在瓜实蝇Zeugodacus cucurbitae两性生殖中的功能，为深入揭示黏连蛋白复合体在瓜实蝇减数分裂和生殖调控中的功能奠定基础。【方法】通过比对NCBI数据库获得瓜实蝇ZcSOLO和ZcSUNN的氨基酸和核苷酸序列，以性成熟瓜实蝇卵巢提取的RNA合成的cDNA为模板克隆Zcsolo和Zcsunn的编码序列(coding sequence, CDS)并测序和生物信息学分析。利用qPCR检测Zcsolo和Zcsunn在瓜实蝇不同发育阶段［胚胎(产卵后15 s及1, 2, 3, 6, 12, 18和24 h)、幼虫(1, 3和7日龄)、蛹(1, 5和9日龄)和成虫(1, 5, 7, 10和15日龄)］以及10日龄成虫组织(头、 胸、 腹、 足、 精巢和卵巢)中的表达量。通过注射dsRNA利用RNAi介导敲降瓜实蝇3日龄成虫Zcsolo和Zcsunn， 在显微镜下观察雌成虫卵巢发育， 测量卵巢面积、 生殖腺形态大小以及交配后的10 d产卵量和卵孵化率。【结果】克隆得到瓜实蝇Zcsolo和Zcsunn正确的CDS。Zcsolo的CDS由5个外显子组成， 长度为2 493 bp， Zcsunn的CDS由15个外显子组成,长度为2 736 bp；瓜实蝇和黑腹果蝇Drosophila melanogaster SOLO和SUNN的蛋白的三维结构非常相似且同源性较高。Zcsolo和Zcsunn在成虫生殖腺中特异性高表达，暗示这两个基因可能与成虫生殖力有关。RNAi介导的Zcsolo和Zcsunn下调导致卵巢发育迟缓、成熟卵泡减少；Zcsolo和Zcsunn RNAi后的雌成虫与野生型雄成虫交配后雌成虫10 d产卵量以及卵孵化率显著降低； Zcsolo和Zcsunn RNAi后的雄成虫与野生型雌成虫交配后野生型雌成虫10 d产卵量未受显著影响但受精后的卵孵化率显著下降，说明Zcsolo和Zcsunn RNAi后雄成虫生殖力减弱。【结论】本研究证实了Zcsolo和Zcsunn对瓜实蝇两性生殖力的必需性，为基于生殖干扰的害虫防控策略提供理论基础。

• 中华按蚊保幼激素环氧水解酶基因AsJHEH的克隆、表达模式及功能分析

  幸晓清,李泉润,陈斌,司风玲

  【目的】保幼激素环氧水解酶(juvenile hormone epoxide hydrolase, JHEH)作为保幼激素代谢通路的关键酶，在昆虫生长发育和生殖调控中起着重要的作用。中华按蚊Anopheles sinensis是疟疾等重要疾病的主要传播媒介，目前对于其JHEH基因在中华按蚊中的作用尚不清楚。本研究旨在解析中华按蚊JHEH的分子特性和基因表达模式，探究JHEH在中华按蚊生殖中的作用。【方法】基于中华按蚊转录组和基因组数据，利用PCR技术扩增中华按蚊AsJHEH的cDNA序列；通过生物信息学工具解析预测AsJHEH的理化特性和结构特征，使用MAGE11.0构建系统进化树；利用RT-qPCR检测AsJHEH在中华按蚊不同发育阶段(卵、1-4龄幼虫、雌蛹、雄蛹和雌雄成虫；化蛹后0, 10, 20和30 h，末期雌蛹以及羽化后0, 6, 12, 24, 36, 48, 60和72 h的雌成虫)、雌雄成虫不同组织(头、胸和腹)、雌成虫不同组织(中肠、马氏管、脂肪体、卵巢和体壁)中的表达量；构建pET32a-AsJHEH原核表达载体，诱导蛋白表达并纯化重组蛋白，制备AsJHEH多克隆抗体；向中华按蚊末期雌蛹注射dsAsJHEH进行RNAi后通过RT-qPCR和Western blotting检测基因沉默效率，并观测中华按蚊成虫羽化率、卵巢发育和单雌产卵量以及羽化后吸血24和48 h成虫中AsVg的表达量。【结果】成功克隆获得中华按蚊AsJHEH cDNA序列(GenBank登录号: PV466834)，长为1 389 bp，编码462个氨基酸，编码蛋白质的预测分子质量为53.02 kD，等电点(isoelectric point, pI)为6.20。AsJHEH含有保守的结构基序，包括催化三联体(Asp234-Glu411-His438)、氧离子孔(Tyr306和Tyr81)以及XWG和HGXP基序。AsJHEH与其他蚊科昆虫JHEH的亲缘关系最近。时空表达模式发现， AsJHEH在中华按蚊各个发育阶段和成虫组织中均有表达，在2龄幼虫中表达量最高，是雌成虫中表达量的888.98倍；在雄成虫头部中高表达，表达量为雌成虫卵巢中表达量的1 198.54倍。通过原核表达系统成功制备了AsJHEH重组蛋白，并获得多克隆抗体效价为1∶128 000。与注射dsEGFP的对照组比较，AsJHEH RNAi后，AsJHEH在中华按蚊mRNA水平和蛋白水平的表达量均显著下降，中华按蚊羽化率下降了26.67%，同时卵巢发育异常，羽化后吸血48 h成虫中AsVg的表达量上调了1.8倍，单雌产卵量降低了52.23%，且所产的卵长度增加了0.2倍并丧失了孵化能力。【结论】本研究首次揭示了AsJHEH在中华按蚊生长发育和生殖调控中具有关键作用，不仅为基于保幼激素降解通路的中华按蚊防治奠定了理论基础，更为研发基于JH代谢的蚊虫生物防治策略提供了潜在分子靶点，具有重要的理论意义与实践价值。

• 吡虫啉胁迫下斑衣蜡蝉解毒代谢的转录组和代谢组学联合分析

  刘保志,白妍妍,刘欣玉,戚煜,赵盈盈,杨佳婷,吕淑杰,谢寿安

  【目的】本研究旨在挖掘斑衣蜡蝉Lycorma delicatula中与解毒代谢相关的基因和代谢物，为进一步研究昆虫的解毒机制奠定基础。【方法】采用浸叶法测定吡虫啉对斑衣蜡蝉成虫的室内毒力，明确其24 h内的亚致死浓度LC10值和致死中浓度(median lethal concentration, LC50)值；采用Illumina HiSeq 2000和TripleTOF 6600+平台对LC10浓度吡虫啉处理的斑衣蜡蝉成虫进行高通量测序，将获得的基因和代谢物的非重复序列分别与NR, Swiss-Prot, Pfam, GO, COG/KOG, KEGG和TrEMBL数据库进行比对，获得unigenes的注释信息，基于DESeq2［｜log2(差异倍数)｜≥1且错误发现率(false discovery rate, FDR)≤0.05］及PLS-DA［变量投影重要性(variable important in projection, VIP)>1, P<0.05］分别筛选出差异表达的解毒酶基因和解毒相关代谢物；将差异表达基因(differentially expressed genes, DEGs)和差异表达代谢物(differentially expressed metabolites, DEMs)注释到KEGG数据库中， 获得两者共有的代谢通路，进一步探究DEGs与DEMs之间的联系。【结果】吡虫啉对斑衣蜡蝉成虫24 h内的LC10值为20.799 mg/L， LC50值为68.707 mg/L，毒力回归方程为y=－4.533+2.467x。LC10浓度吡虫啉处理的斑衣蜡蝉成虫转录组测序共获得93 157个基因和179 317条转录本。KEGG注释结果表明， LC10浓度吡虫啉处理组和清水对照组转录组间168个DEGs参与了11类代谢通路，其中涉及到碳水化合物代谢的DEGs最多，为50个；其次为涉及到氨基酸代谢的DEGs，为24个；筛选出可能与解毒相关的DEGs 6个，来自细胞色素P450和UGT基因家族。从LC10浓度吡虫啉处理组和清水对照组代谢组间筛选出DEMs 134个，其中87个代谢物表达下调， 47个代谢物表达上调，这些代谢物主要包括苯衍生物、氨基酸及其代谢物、有机酸及其衍生物、杂环化合物、醛、酮和酯类等。【结论】构建了LC10浓度吡虫啉处理的斑衣蜡蝉成虫转录组和代谢组数据库，筛选出细胞色素P450和UGT基因等解毒相关DEGs，筛选出部分DEMs，初步探究了斑衣蜡蝉的解毒机制，研究结果可为半翅目(Hemiptera)其他昆虫相关研究提供参考，同时可为解毒酶基因功能分析及斑衣蜡蝉解毒机制进一步研究奠定基础。

• 甲维盐胁迫调控雷帕霉素诱导下松材线虫的生存、繁殖及自噬相关基因的表达

  张琳沅,薛旗,汪勇,曹夏意,闵莉静,张立钦,刘浩然,张雪柯

  【目的】本研究旨在探究自噬在松材线虫Bursaphelenchus xylophilus抵御环境友好型农药甲维盐胁迫中的作用，以解决长期单一用药易导致抗性的问题。【方法】采用浸渍法测定甲维盐对松材线虫成虫的24 h毒力；分别使用0.5和50 mmol/L雷帕霉素诱导松材线虫成虫细胞自噬再用0.2, 0.4, 0.6, 0.8和1.0 mg/L甲维盐处理24 h，计算松材线虫成虫的死亡率； LC20浓度(0.30 mg/L)和致死中浓度(median lethal concentration, LC50)(1.14 mg/L)甲维盐处理经50 mmol/L雷帕霉素处理1 h时的松材线虫成虫，计算处理后7 d时成虫的繁殖量； PCR克隆松材线虫自噬相关基因BxATG2,BxATG11和BxATG18并进行生物信息学分析；用50 mmol/L雷帕霉素处理后再用LC50浓度(1.14 mg/L)和高浓度(3.20 mg/L)甲维盐处理松材线虫成虫24 h时，采用qRT-PCR检测松材线虫成虫关键自噬相关基因(BxATG2,BxATG6,BxATG10,BxATG11,BxATG12和BxATG18)的表达量。【结果】松材线虫成虫死亡率随甲维盐浓度升高而增加，甲维盐对松材线虫成虫24 h 的LC20和LC50值分别为0.30和1.14 mg/L。经雷帕霉素诱导自噬后，甲维盐对松材线虫成虫的致死率有所下降。松材线虫成虫繁殖量随甲维盐浓度升高而降低，雷帕霉素诱导后繁殖量略有上升，但变化不显著。成功克隆的自噬相关基因BxATG2,BxATG11和BxATG18的编码蛋白与近缘线虫同源蛋白具有较高的氨基酸序列一致性；BxATG2, BxATG11和BxATG18均为酸性疏水蛋白，无信号肽和跨膜区；BxATG2, BxATG11和BxATG18与伞滑刃属Bursaphelenchus线虫相应蛋白亲缘关系最近。50 mmol/L雷帕霉素预处理本身即显著改变了BxATG11和BxATG12的表达，1.14和3.20 mg/L甲维盐处理均上调了BxATG2,BxATG6,BxATG10,BxATG11和BxATG18的表达，50 mmol/L雷帕霉素诱导后进一步增强了甲维盐(尤其是3.20 mg/L高浓度)对BxATG2,BxATG6,BxATG10,BxATG11和BxATG18的上调作用。【结论】 细胞自噬在松材线虫成虫抵御甲维盐胁迫中发挥重要作用，雷帕霉素可通过诱导体内自噬相关基因(如BxATG2,BxATG6,BxATG10,BxATG11和BxATG18)的表达，增强松材线虫对甲维盐的抵抗力。本研究深化了对生物适应性演化的认识，为开发基于调控自噬通路的新型松材线虫病防控策略提供了理论依据和参考。

• 三种虫生真菌对番茄潜叶蛾幼虫的室内毒力测定及温室防治效果

  田浩然,颜晓曦,李金鹏,白明,王新谱,洪波,贾彦霞

  【目的】本研究旨在明确3种虫生真菌对番茄潜叶蛾Tuta absoluta的杀虫效果，为番茄潜叶蛾的生物防治提供理论参考。【方法】采用点滴法，分别测定了不同浓度(1.0×106， 1.0×107和1.0×108 cfu/mL)的3种虫生真菌(蜡蚧轮枝菌Lecanicillium lecanii JMC-01、木贼镰刀菌Fusarium equiseti JMF-01和雷斯青霉Penicillium raistrickii F-1紫外诱变菌株YB4)孢子悬浮液对番茄潜叶蛾1-2龄幼虫的室内毒力；根据室内毒力测定结果，用1.0×108 cfu/mL的3种虫生真菌孢子悬浮液在温室中采用随机区组法评价其对番茄潜叶蛾幼虫的防治效果。【结果】室内毒力结果表明，这3种虫生真菌对番茄潜叶蛾1-2龄幼虫均具有显著的毒力，在测试的最高浓度(1.0×108 cfu/mL)下，蜡蚧轮枝菌JMC-01、雷斯青霉F-1紫外诱变菌株YB4 和木贼镰刀菌JMF-01孢子悬浮液引起的番茄潜叶蛾1-2龄幼虫的5 d累计校正死亡率分别为71.79%, 61.54%和58.97%, 对番茄潜叶蛾1-2龄幼虫的致死中时(median lethal time, LT50)值分别为75.5166， 89.1429和96.4826 h。温室防治效果试验中，在1.0×108 cfu/mL浓度下，在第2次施药7 d后，蜡蚧轮枝菌JMC-01对番茄潜叶蛾幼虫的防治效果达到69.28%，雷斯青霉F-1诱变菌株YB4与木贼镰刀菌JMF-01对番茄潜叶蛾幼虫的防治效果分别达到了52.69%和52.30%。【结论】 3种虫生真菌对番茄潜叶蛾1-2龄幼虫均有一定的防治效果，其中蜡蚧轮枝菌JMC-01防治效果最高，具有作为番茄潜叶蛾生物防治剂的潜力。

• 三种寄主植物上烟蓟马生长发育和繁殖力的比较

  常译方,孙浩宇,李文宇,孙丽娟,郑长英

  【目的】烟蓟马Thrips tabaci作为葱蒜作物上的重要害虫，在我国各省(自治区、直辖市)均有为害，其寄主范围涵盖大葱Allium fistulosum、蒜、番茄、马铃薯、瓜类、豆类、十字花科蔬菜以及烟草、棉花等数十种作物，但针对其在不同寄主植物上的生物学特性研究较少。本研究通过构建烟蓟马在3种寄主植物上的年龄龄期两性生命表，研究烟蓟马在3种寄主植物（大葱叶片、韭菜A. tuberosum叶片和芸豆Phaseolus vulgaris豆荚）上的生长发育繁殖特性，从而掌握其生物学特性，为室内种群饲养和科学防治提供依据。【方法】在温度(25±0.5) ℃、相对湿度55%±5%和光周期16L∶8D的实验室控制条件下，构建其年龄-龄期两性生命表，研究大葱叶片、韭菜叶片和芸豆豆荚对烟蓟马种群的影响，使用TWOSEX-MSChart程序计算发育历期、总产卵前期、单雌产卵量、寿命期望值、繁殖值等参数，并利用TIMING-MSChart程序预测了种群发展趋势。【结果】以芸豆豆荚为食的烟蓟马未成熟期(14.71 d)、成虫寿命(15.80 d)、平均世代周期T(26.34 d)显著长于取食大葱叶片的烟蓟马(分别为13.93, 11.11和23.45 d)及取食韭菜叶片的烟蓟马(分别为13.90, 10.80和23.01 d)， 取食芸豆豆荚的烟蓟马的净增殖率R0(11.08)、 内禀增长率r(0.0913 d-1)和周限增长率λ(1.09 d-1)显著高于取食大葱叶片的烟蓟马(分别为4.32, 0.0624 d-1和1.06 d-1)及取食韭菜叶片的烟蓟马(分别为4.28, 0.0632 d-1和1.06 d-1)，而取食大葱叶片的烟蓟马与取食韭菜叶片的烟蓟马两者之间的净增殖率、内禀增长率和周限增长率无显著差异。【结论】室内饲养烟蓟马，在大葱叶片、韭菜叶片和芸豆豆荚上均可完成其生活史，其中取食芸豆豆荚的烟蓟马相较于取食其他两种寄主植物的烟蓟马虽然未成熟期更长，但繁殖力最高，种群繁殖能力最强，芸豆更有利于烟蓟马的种群增长。本研究为烟蓟马种群预测与田间防控提供了理论依据。

• 蜂蜜发酵挥发物对梨小食心虫雌蛾嗅觉及产卵行为的调控作用

  牛国飞,韦小雪,王怡,董阿梅,李捷,马瑞燕,孔维娜

  【目的】梨小食心虫Grapholita molesta是一种世界性分布的重要蔷薇科(Rosaceae)果树害虫。雌蛾羽化后需摄食以促进生殖发育，实验室常以蜂蜜供其取食，但蜂蜜易发酵，其产生的挥发性化合物对梨小食心虫雌蛾嗅觉行为的影响尚不明确。【方法】本研究选取实验室常用的非寄主植物源蜂蜜(冠生园)及2种寄主植物源蜂蜜(疆山情和杨老四)，采用顶空固相微萃取-气相色谱质谱联用技术(headspace solid-phase microextraction-gas chromatography-mass spectrometry, HS-SPME-GC-MS)分析蜂蜜发酵前后挥发物成分的变化，筛选关键差异挥发性化合物；结合昆虫触角电位(electroantennogram, EAG)测定与产卵选择行为试验，明确梨小食心虫已交配3日龄雌蛾对5个浓度(0.01, 0.1, 1, 10和100 μg/μL)的4种挥发性化合物(异戊醇、乙酸乙酯、乙酸异戊酯和正辛烷)的嗅觉行为反应。【结果】从3种蜂蜜样品中共检测出40种挥发物成分， 3种蜂蜜发酵前后挥发物的成分及其含量均存在差异。乙酸乙酯、乙醇和乙酸异戊酯在所有样品中均存在，冠生园和杨老四蜂蜜在发酵与未发酵状态下均检测到正辛烷。3种发酵蜂蜜样品中异戊醇含量均较高，而发酵疆山情蜂蜜缺失了未发酵状态下含量较高的正辛烷。EAG试验结果表明， 10 μg/μL异戊醇、 100 μg/μL乙酸乙酯、 100 μg/μL乙酸异戊酯和1 μg/μL正辛烷可激发梨小食心虫雌蛾强烈的嗅觉反应。产卵选择试验结果表明，蜂蜜发酵挥发性化合物对梨小食心虫雌蛾行为的作用具有浓度效应。异戊醇在0.01和1 μg/μL时对梨小食心虫雌蛾表现出引诱作用，而在10和100 μg/μL时对梨小食心虫雌蛾表现出驱避作用。乙酸乙酯和乙酸异戊酯在高浓度(10~100 μg/μL)时对梨小食心虫雌蛾表现出引诱作用。正辛烷仅在0.1 μg/μL时对梨小食心虫雌蛾表现出驱避作用，在0.01, 1和100 μg/μL时对梨小食心虫雌蛾表现出引诱作用。【结论】本研究揭示了蜂蜜发酵显著改变了挥发物成分和含量，并发现异戊醇、乙酸乙酯、乙酸异戊酯和正辛烷对梨小食心虫雌蛾的嗅觉及产卵行为具有浓度依赖性调控作用，为嗅觉行为调控技术的开发提供理论支持。

• 云南西双版纳侧齿开臂反颚茧蜂的鉴定、生物学特性观察及其对果蝇属害虫的生物防治潜力评估

  汪泽莹,朱弘毅,付莉迪,封虹羽,王莹,黄健华,陈佳妮

  【目的】本研究旨在明确云南西双版纳侧齿开臂反颚茧蜂Asobara pleuralis(版纳种群)的生物学特性及其对果蝇属Drosophila害虫的控害潜力，为构建斑翅果蝇Drosophila suzukii等浆果类水果害虫的生物防治策略提供理论依据。【方法】通过基于COⅠ基因分子鉴定和形态特征观察，鉴定自云南西双版纳地区采集到的一些自果蝇属Drosophila昆虫中羽化的寄生蜂成虫个体；在实验室条件下，观察记录鉴定的寄生蜂各发育阶段形态特征与历期，并统计成虫寿命；以黑腹果蝇D. melanogaster 2龄幼虫为寄主，测定在不同寄生时长(0.5， 1 和2 h)处理下该寄生蜂的产卵率、寄生率、出蜂率及性比（雌雄比），并进一步测定该寄生蜂对9种果蝇属害虫2龄幼虫的寄生能力。【结果】结合形态和分子鉴定得出该寄生蜂为侧齿开臂反颚茧蜂。在温度(25±1) ℃、相对湿度50%±1%和光周期16L∶8D条件下，侧齿开臂反颚茧蜂的卵历期为(1.87±0.01) d、幼虫历期为(4.39±0.02) d、 雌蛹历期为(7.12±0.06) d、雄蛹历期为(5.34±0.05) d；雌成虫中位生存时间为38 d，显著高于雄成虫的中位生存时间(12 d)。在2 h寄生处理下，侧齿开臂反颚茧蜂对黑腹果蝇2龄幼虫的寄生效率最佳，其产卵率、寄生率及出蜂率分别达100%, 100%和81.17%±2.81%，高于0.5 h处理组(分别为92.50%±1.26%, 91.00%±0.88%和64.17%±1.29%及1 h处理组(100%, 97.84%±0.42%和68.67%±1.42%)。在此最佳寄生时长下，侧齿开臂反颚茧蜂能高效寄生斑翅果蝇在内的多种果蝇属害虫， 对7种寄主果蝇2龄幼虫的寄生率超过90%， 其中对斑翅果蝇2龄幼虫的寄生率高达97.56%±0.44%。【结论】侧齿开臂反颚茧蜂对斑翅果蝇具有高效的寄生能力，且具有广谱的寄主范围。本研究为基于多次释放寄生蜂策略的斑翅果蝇防控体系提供了理论基础，也为使用生产寄主进行侧齿开臂反颚茧蜂的规模化繁育提供了技术支持。

• 基于微滴式数字PCR技术多重精准检测鉴定三种常见检疫性粉蚧

  李鑫,李辉,李立梅,杨力凤,孟凡泽,褚栋,付海滨

  【目的】应用微滴式数字PCR(droplet digital PCR，ddPCR)技术，建立大洋臀纹粉蚧Planococcus minor、南洋臀纹粉蚧Pl. lilacinus和木瓜秀粉蚧Paracoccus marginatus 3种高频截获检疫性粉蚧多重精准检测方法。【方法】以口岸截获和国内采集的常见粉蚧大洋臀纹粉蚧、南洋臀纹粉蚧、木瓜秀粉蚧、新菠萝灰粉蚧Dysmicoccus neobrevipes、杰克贝尔氏粉蚧Pseudococcus jackbeardsleyi、木槿曼粉蚧Maconellicoccus hirsutus、康氏粉蚧Ps. comstocki和桔臀纹粉蚧Pl. citri为参试材料，选择COⅠ基因序列为靶标，使用GenBank 数据库、 MEGA11和Beacon Designer 8等进行同源性比对和特异性引物与探针设计;在构建的大洋臀纹粉蚧、南洋臀纹粉蚧和木瓜秀粉蚧 3种粉蚧单重ddPCR检测体系的基础上，通过筛选最佳引物和探针浓度优化反应体系，建立可同时快速、绝对定量检测大洋臀纹粉蚧、南洋臀纹粉蚧和木瓜秀粉蚧基因组拷贝数的多重ddPCR检测方法，并与TaqMan qPCR方法进行比较，测定该方法的灵敏度、定量限及准确性。【结果】构建的多重ddPCR检测体系内各组引物和探针对目标粉蚧基因组均能扩增，未出现交叉反应， DNA最低检测浓度与TaqMan qPCR中的一致。这一多重ddPCR体系对大洋臀纹粉蚧基因组的绝对定量检测低限为0.44拷贝/μL，对南洋臀纹粉蚧基因组的绝对定量检测低限为0.43拷贝/μL，对木瓜秀粉蚧基因组的绝对定量检测低限为0.44拷贝/μL。在定量检测范围内这一多重ddPCR体系定量检测的线性决定系数R2均大于0.99，且重复性和线性相关性较好。【结论】本研究建立的多重ddPCR检测方法可实现对3种高频截获检疫性粉蚧大洋臀纹粉蚧、南洋臀纹粉蚧和木瓜秀粉蚧快速、精准鉴定，为口岸外来有害生物防控和保护我国生态安全提供技术服务和支持。

• 基于MATLAB技术的蝴蝶图像识别研究——以甘肃连城国家级自然保护区蝶类为例

  周援知,刘雪纯,胡钰沛,王立祥,陈潇潇,尚素琴

  【目的】基于卷积神经网络特征提取，本研究探究融合GoogLeNet网络模型与数字图像特征信息来准确识别野外蝴蝶的可行性。【方法】选取甘肃省连城国家级自然保护区内丰富度高的鳞翅目(Lepidoptera)蝶类4科9种，其中成虫标本图像3 704幅，用以构建蝴蝶图像识别模型，并采集具有干扰因素的野外蝴蝶图像376幅，从中筛选出识别精度最高最优的一种模型。通过对GoogLeNet网络模型采用修改模型内部结构及调整参数的方法，并使用PhotoShop对图像进行后期处理，从而优化激活函数,减少参数量，提高计算速度和特征提取能力以准确识别蝴蝶种类。【结果】利用MATLAB软件平台共训练出10种模型，然后根据模型大小、精确度、识别效率等参数筛选出4种最优模型，在此基础上选用性能最好的模型构建了所选取9种代表性蝴蝶白眼蝶Melanargia halimede、菜粉蝶Pieris rapae、橙黄豆粉蝶Colias fieldii、柑橘凤蝶Papilio xuthus、钩粉蝶Gonepteryx rhamni、锦瑟蛱蝶Seokia pratti、仁眼蝶Hipparchia autonoe、荨麻蛱蝶Aglais urticae和重环蛱蝶Neptis alwina的诊断体系。经平台训练60 min后，模型对检验数据集的诊断准确率达100.0%。人为添加干扰项后，改进的GoogLeNet模型准确率仍保持在94.7%。多数据模型训练后发现，数据集数量越多，图像质量越高，模型的识别精确度就越高。【结论】本研究构建的模型一定程度上克服了单一特征识别蝴蝶种类的不足，提高了野外蝴蝶识别的准确性，且模型稳定性强，能够为蝴蝶智能识别提供技术支撑，为后续识别平台的开发奠定了基础。

• 光污染对昆虫的影响研究进展

  杨小凡,张凡,蒋月丽,李建成,秦秋菊,马爱红,魏国树

  自20世纪初电力照明普及以来，夜间人造光源(artificial light at night， ALAN)的过度或不当使用导致的光污染问题在全球范围内不断加剧，已成为全球变化背景下备受关注的新兴环境问题。光污染通过显著改变自然夜间光环境的光照强度、光谱组成、光暗周期和偏振光特性等关键参数，干扰昆虫对空间位置、方向和时间等信息的正确感知。研究表明，光污染对昆虫产生从个体到生态系统的多层次负面影响，包括干扰趋光行为、定位导航障碍、生物节律紊乱、发育繁殖抑制、种群数量衰退和群落结构改变等，严重威胁昆虫多样性和生态系统功能。鉴于当前国内在光污染领域研究的薄弱和局限性，本文从光污染的特点及生态影响，光污染对昆虫行为、生长发育和繁殖的影响以及光污染对昆虫种群和群落结构的影响3个方面对相关研究进展进行了综述，并提出以下重点研究方向：(1)光污染的长期累积生态效应；(2)害虫灯光防控技术的生态风险效益权衡；(3) ALAN对昆虫生理和行为的跨尺度调控机制；(4)昆虫对光污染的适应机制；(5)光污染与气候变暖对昆虫的交互效应。本文为光污染的生态风险评估和害虫防控策略的制定提供重要参考和新思路。

• 农药对蜜蜂的生态风险评估：暴露评估、效应评估和风险表征

  徐超龙,荀杨,周蕾,袁善奎,尹晓辉

  蜜蜂作为农业生态系统的关键传粉者，其种群衰退与农药暴露的关联性已成为全球研究热点,不同类型的农药会对蜜蜂产生不同的毒性效应，开展农药对蜜蜂的生态风险评估对保护蜜蜂种群尤为重要。本文从暴露评估、效应评估和风险表征这几个方面综述了欧盟、美国及中国关于农药对蜜蜂的生态风险评估研究进展。暴露评估中，欧盟、美国及中国采用了不同暴露模型，研究表明，欧盟通过参数化暴露模型与三级评估体系(筛查级至田间试验)实现了定量化风险预测；美国的暴露模型采用多因素模拟，基于全球现实数据评估等特点；而中国虽已建立本土化评估标准，但在混合毒性评估、蜂群动态模型及本土蜂种的数据积累方面仍存短板。效应评估中，欧盟、美国及中国都采用了从低级到高级的评估方式，包括个体毒性效应、群体毒性效应和分子毒性效应。风险表征中，美国采用风险商值(risk quotient, RQ)进行评估［RQ＝估计环境浓度(estimated environmental concentration, EEC)/致死中剂量(median lethal dose, LD50)］，若RQ＞关注程度(level of concern, LOC)，后续需进一步评估。欧盟采用危害商值(hazard quotient, HQ)［HQ=施药量(application rate, AR)/LD50］进行评估，当HQ＞50时，就必须开展高级风险评估。中国采用双轨评估框架： 在喷施场景中， RQ=AR/LD50×50；在土壤或种子处理场景下， RQ=预测暴露剂量(predicted exposure dose, PED)/预测无效应剂量(predicted no-effect dose, PNED)；若RQ≤1，判定风险可接受; RQ＞1，风险不可接受。总体而言，欧盟评估体系相对完善，将大黄蜂和独居蜂纳入评估体系；涵盖农药代谢物与混合物对蜜蜂的风险评估的方法与流程等。中国应尽快建立相关评估体系，完善评估标准，为农药的有效管理和保护蜜蜂种群提供切实可行的方案。

• 环裂下目分类、系统发育及基因组的研究进展

  袁缓,陈斌

  环裂下目(Cyclorrhapha)是昆虫纲(Insecta)双翅目(Diptera)短角亚目(Brachycera)中最大适应辐射类群，占双翅目已知物种多样性的近43%。环裂下目全球广泛分布，生物学习性多样，在生态系统中扮演重要角色。环裂下目不仅是媒介生物、传粉昆虫、法医昆虫和天敌昆虫等多领域的研究热点，也是探究双翅目短角亚目系统演化及其适应辐射的关键类群，但其分类系统混乱，内部系统发育关系远不明晰。为重建环裂下目内部的系统发育关系，许多研究双翅目昆虫的学者依据不同类型的数据和方法先后对该类群开展过不同层面的研究。环裂下目的单系性得到了普遍支持，进一步归类为并系的无缝组(Aschiza)和单系的有缝组(Schizophora)。环裂下目约有15总科103科，在科级水平，扁足蝇总科(Platypezoidea)和蚜蝇总科(Syrphoidea)的成员科在环裂下目基部的系统地位存在争议；蚜蝇总科的单系性在形态和分子证据下不一致；有缝组内部分科的地位仍不明确［如短芒腐木蝇科(Acartophthalmidae)、刺股蝇科(Megamerinidae)、佛蝇科(Fergusoninidae)、妖蝇科(Mormotomyiidae)、Marginidae、鼓翅蝇科(Sepsidae)和尖尾蝇科(Lonchaeidae)等］；部分亚科的科级地位提升存在争议［如澳蝇科(Sciadoceridae)、岸蝇科(Tethinidae)、Stenomicridae、Campichoetidae和Heteromyzidae］。尽管环裂下目有瓣类(Calyptratae)在系统发育研究中取得了显著进展，然而其余类群受限于采样覆盖不足、分子数据覆盖度不均及化石证据匮乏，其系统发育关系与演化历史仍存在诸多未解之谜。本文系统梳理了环裂下目分类系统的历史变化，并综合评述其系统发育研究进展，总结目前存在的系统发育争议问题和基因组数据现状，并提出相关研究建议，为下一步基于系统基因组学探究系统发育关系及演化历史提供借鉴。