昆虫学报

作者：王谦稳,杨任铎,李安琪,卜春亚

单位：北京农学院生物与资源环境学院, 农业农村部华北都市农业重点实验室, 北京 102206

关键词：朱砂叶螨,V-ATP酶,原核表达,RNA干扰,纳米载体

【目的】探索纳米载体星形阳离子聚合物(star polycation, SPc)介导V-ATP酶H亚基基因TcV-ATPase-H的RNAi对朱砂叶螨Tetranychus cinnabarinus雌成螨的毒效。【方法】通过PCR克隆朱砂叶螨TcV-ATPase-H；利用RT-qPCR检测TcV-ATPase-H在朱砂叶螨不同发育阶段(卵、幼螨、若螨和雌成螨)的表达量；分别通过叶碟法和纳米载体介导对朱砂叶螨雌成螨的TcV-ATPase-H进行RNAi，检测校正死亡率；通过草莓盆栽实验，检测dsTcV-ATPase-H/SPc和苦参碱联合施用对草莓叶片上朱砂叶螨雌成螨的毒效，测定草莓顶端新叶叶绿素含量和草莓植株地上部位干重，同时以玻片浸渍法测定dsTcV-ATPase-H/SPc和苦参碱联合施用对非靶标生物加州新小绥螨Neoseiulus californicus的毒力。【结果】克隆获得朱砂叶螨TcV-ATPase-H cDNA序列； TcV-ATPase-H在朱砂叶螨卵、幼螨、若螨和雌成螨中均表达，其中以在雌成螨中表达量最高，在幼螨中表达量最低。叶碟法对朱砂叶螨饲喂dsTcV-ATPase-H能够有效降低TcV-ATPase-H的表达量59%， 72 h时引起的朱砂叶螨雌成螨的校正死亡率达到37.99%，与对照组dsEGFP相比有显著提高；纳米载体介导比非纳米载体介导TcV-ATPase-H的RNAi能够显著降低TcV-ATPase-H的表达量20%，同时使校正死亡率显著提高了28.25%。纳米载体介导dsTcV-ATPase-H和苦参碱的联合施用能显著降低朱砂叶螨雌成螨的存活数，对朱砂叶螨种群生长有明显抑制效果，但对草莓植株叶绿素含量及草莓植株地上部位干重和加州新小绥螨的死亡率均不产生显著影响。【结论】 纳米载体介导dsTcV-ATPase-H能够提高对TcV-ATPase-H表达的抑制，提高对朱砂叶螨的致死效果，该研究为后期研发纳米材料包裹dsV-ATPase-H的RNA农药提供了实验基础。

来源：2025年第11期

《昆虫学报》期刊编辑部

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