昆虫学报

作者：刘铭,格茸楚姆,卜春亚

单位：北京农学院生物与资源环境学院, 农业农村部华北都市农业重点实验室, 北京 102206

关键词：朱砂叶螨,β-N-乙酰己糖胺酶,20羟基蜕皮酮,差异表达基因,RANi

【目的】本研究旨在探明朱砂叶螨Tetranychus cinnabarinus几丁质降解通路中的关键酶β-N-乙酰己糖胺酶基因(TecHEX3)在螨蜕皮发育中的功能，为开发新型安全的防治害螨生物农药奠定基础。【方法】利用PCR克隆朱砂叶螨TecHEX3，并进行生物信息学分析。利用RT-qPCR检测TecHEX3在朱砂叶螨不同发育阶段(卵、幼螨、若螨和成螨)以及饲喂蜕皮激素20-羟基蜕皮酮(20-hydroxyecdysone, 20E)的若螨中的表达量。通过饲喂法进行朱砂叶螨雌成螨和若螨TecHEX3的RNAi，分析沉默效率，统计并观察朱砂叶螨若螨的死亡率和致死表型。【结果】成功克隆了朱砂叶螨TecHEX3(GenBank登录号: OR413561)，其编码蛋白具有典型的20糖苷水解酶家族结构特征；系统发育树表明TecHEX3与二斑叶螨T. urticae TuHEX3的亲缘性最高且均属于β-N-乙酰己糖胺酶Ⅳ型。TecHEX3在朱砂叶螨不同发育阶段都有表达，在成螨期表达量最高；饲喂500 ng/μL的20E对TecHEX3的表达有最好的诱导效果。RNAi结果表明饲喂dsTecHEX3时朱砂叶螨若螨TecHEX3表达量较对照组(饲喂dsEGFP)显著下调81%；沉默TecHEX3导致朱砂叶螨蜕皮困难或蜕皮后形态异常，致死率达40.58%。【结论】TecHEX3参与朱砂叶螨几丁质降解过程，并在朱砂叶螨的蜕皮发育过程中发挥重要作用。

来源：2024年第5期

《昆虫学报》期刊编辑部

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