昆虫学报

作者：郭晓丽,文超,温俊宝,温晓健

单位：1. 北京林业大学, 林木资源高效生产全国重点实验室, 北京 100083; 2. 北京林业大学, 林木有害生物防治北京市重点实验室,北京 100083; 3. 北京林业大学草业与草原学院, 北京 100083; 4. 中国林业科学研究院森林生态环境与自然保护研究所,国家林业和草原局森林保护学重点实验室, 北京 100091

关键词：沟眶象,产卵量；味觉受体基因；RNAi；表达模式

【目的】分析和阐明沟眶象Eucryptorrhynchus scrobiculatus味觉受体基因EscrGR8的分子特性和功能，揭示其调节雌成虫繁殖力的作用。【方法】基于沟眶象触角转录组数据库，采用RACE克隆EscrGR8的cDNA全长序列；利用qRT-PCR检测EscrGR8在沟眶象不同发育阶段(卵、 1-6龄幼虫、蛹、雌成虫和雄成虫)和雌雄成虫组织(去除触角和喙的头、触角、口器、中肠、前足、睾丸、卵巢、雄虫交配器和雌虫产卵器)中的表达量。显微注射雌成虫dsRNA后0, 6, 12, 24， 36， 48和72 h时利用qRT-PCR检测RNAi后EscrGR8的表达量。检测显微注射dsEscrGR8后1-5 d和6-11 d时沟眶象雌成虫在不同土壤含水量(0~10%, 11%~20%, 21%~40%, 41%~60%, 61%~80%和81%~100%)条件下的产卵选择率、总产卵数量和所产卵的孵化率，研究抑制EscrGR8表达对雌成虫产卵选择性和繁殖力的影响。【结果】成功克隆了沟眶象EscrGR8 (GenBank登录号: OR836580)的cDNA全长序列，开放阅读框(ORF)长1 251 bp，编码了416个氨基酸，具有6个跨膜结构域。多序列比对和系统发育进化分析结果表明， EscrGR8与其他昆虫的GR的氨基酸序列同源性普遍较低，其中与棉铃象甲Anthonomus grandis的AgraGR64f氨基酸序列一致性为3096%。qRT-PCR检测结果表明， EscrGR8在沟眶象不同发育阶段和成虫组织中的表达量具有显著差异， EscrGR8在雌成虫中的表达量最高，在卵中的表达量最低；EscrGR8在雌成虫卵巢中特异性高表达。显微注射dsEscrGR8不仅在一定时间内显著降低EscrGR8的表达量，并且对雌成虫的产卵选择性具有显著影响。显微注射dsEscrGR8后1-5 d时沟眶象雌成虫在含水量21%~40%土壤条件下的产卵选择率和所产卵的孵化率与显微注射dsGFP的对照组相比分别显著降低了2466%和1583%；在含水量81%~100%土壤条件下的产卵选择率与显微注射dsGFP的对照组相比显著增加了28.39%，雌成虫所产卵几乎不孵化。【结论】本研究证实了味觉受体基因EscrGR8对沟眶象雌成虫产卵选择和繁殖力的影响，有助于理解昆虫味觉受体基因的多样性和功能特异性。

来源：2024年第3期

《昆虫学报》期刊编辑部

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