昆虫学报

作者：陈明明,焦振龙,赵文静,国果

单位：1. 贵州医科大学基础医学院病原生物学特色重点实验室, 贵阳 550025; 2. 贵州医科大学转化医学研究中心, 贵阳 550025;3. 贵州医科大学环境污染与疾病监控教育部重点实验室, 贵阳 550025

关键词：家蝇；血细胞；MD14-3-3,酵母双杂交；互作蛋白

【目的】构建家蝇Musca domestica酵母双杂交cDNA文库，筛选MD14-3-3互作蛋白。【方法】以家蝇为研究对象，经mRNA纯化、cDNA初级文库构建、重组pGADT7-DEST构建次级文库，构建酵母双杂交筛选系统，构建pGBKT7-MD14-3-3质粒作为诱饵筛选与MD14-3-3相互作用的蛋白，并进行回转验证。【结果】成功构建文库容量为1.6×107 CFU，重组率为100%的家蝇酵母双杂交cDNA文库。酵母双杂交筛选获得2个靶蛋白，回转试验表明mucin-like protein HKR1与抗菌肽ctenidin-1为MD14-3-3的互作蛋白。【结论】从成功构建的家蝇酵母双杂交cDNA文库中筛选出MD14-3-3蛋白的2个互作蛋白，为进一步探究家蝇免疫应答机制奠定了基础。

来源：2023年第11期

《昆虫学报》期刊编辑部

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