昆虫学报

作者：郭迪,张素,李剑,高聪芬,吴顺凡

单位：1. 南京农业大学植物保护学院, 南京210095; 2. 绿色农药创制与应用技术国家地方联合工程研究中心, 南京 210095;3. 南京农业大学三亚研究院， 三亚 572025

关键词：褐飞虱,硫激肽,硫激肽受体,转录组,取食行为

【目的】明确硫激肽(sulfakinin, SK)及硫激肽受体(sulfakinin receptor, SKR)在褐飞虱Nilaparvata lugens取食行为中的作用。【方法】PCR克隆褐飞虱硫激肽基因Nlsk及其受体基因NlskrcDNA全长序列并进行生物信息学分析；利用qRT-PCR检测Nlsk及Nlskr在褐飞虱不同发育阶段(卵、1-5龄若虫、雄成虫和雌成虫)和雌成虫不同组织(头、触角、翅、口针、足、肠道和马氏管)中的表达量；褐飞虱3龄若虫注射dsNlskr进行基因沉默，qRT-PCR检测4龄若虫中Nlskr的表达量，测定4龄若虫的取食量；基于已构建的Nlskr RNAi后的4龄若虫转录组数据库进行差异表达基因(differentially expressedgenes, DEGs)的GO和KEGG分析以及取食相关基因的qRT-PCR验证。【结果】PCR克隆得到了褐飞虱Nlsk(GenBank登录号: AB817281)及Nlskr (GenBank登录号: BAO01059.1)的cDNA全长序列。序列比对结果显示，褐飞虱NlSK成熟肽具有与其他物种保守的C端FMRFamide型多肽结构。NlSKR与其他昆虫同源受体存在高度保守的跨膜结构域。qRT-PCR检测结果表明，Nlsk与Nlskr在卵和1龄若虫中高表达，两基因均主要在头部表达，Nlskr还在褐飞虱口针中高表达。RNAi沉默Nlskr可显著提高褐飞虱4龄若虫的取食量；基于转录组数据DEGs的GO和KEGG分析结果表明，RNAi沉默Nlskr可显著影响褐飞虱嗅觉、味觉、能量代谢以及取食相关神经肽及受体基因的表达;取食相关基因的qRT-PCR验证结果表明，沉默Nlskr降低Nl7tmOR,NlOAR-3R, NlUH-FAF和NlTRP-161A的表达量，而提高NlGr64f, NlUE-E2和NlTHR的表达量。【结论】本研究明确了硫激肽及其受体参与调控褐飞虱取食行为，为害虫取食行为抑制剂研发提供了潜在靶点。

来源：2023年第3期

《昆虫学报》期刊编辑部

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