昆虫学报

作者：郑海霞,张敏,魏国华,崔小林,张仙红

单位：山西农业大学植物保护学院, 太谷 030801

关键词：绿豆象,触角,气味受体,基因克隆,组织特异性表达

【目的】本研究旨在克隆绿豆象Callosobruchus chinensis触角4个普通气味受体(odorant receptor, OR)基因，明确这些OR基因在绿豆象不同日龄雌雄成虫组织中的表达谱，为进一步研究基因功能奠定基础。【方法】基于绿豆象成虫触角转录组数据，预测绿豆象OR候选基因；利用RT-PCR克隆绿豆象4个OR基因的全长cDNA序列，并对其进行生物信息学分析；利用qPCR检测这4个OR基因在绿豆象雌雄成虫不同组织(触角、不含触角的头、腹、足和翅)中以及1, 3和5日龄雌雄成虫触角中的表达量。【结果】根据预测的基因序列，克隆得到4个绿豆象气味受体基因的cDNA全长序列，分别命名为CchiOR8, CchiOR10, CchiOR16和CchiOR39，GenBank登录号分别为MW732665, MN832705, MW732664和MN832706；编码的氨基酸数目分别为369, 352, 400和367。系统发育树分析表明，CchiOR8, CchiOR10和CchiOR16均与大猿叶甲Colaphellus bowringi的同源蛋白亲缘关系较近，而CchiOR39与果蝇Drosophila biarmipes和拟果蝇D. simulans的同源蛋白聚在一起。qPCR结果显示，这4个OR基因在绿豆象雌雄成虫的各组织中均有表达，且均在触角中高表达；CchiOR10和CchiOR39在雌成虫触角中表达量显著高于在雄成虫触角中的, CchiOR16在雄成虫触角中的表达量显著高于在雌成虫触角中的，而CchiOR8在雌雄成虫触角中的表达量无显著差异。此外，绿豆象成虫触角中4个OR基因的表达量表现出一定程度的日龄差异，CchiOR8, CchiOR16和CchiOR39在雄成虫触角中的表达量均先升高后降低，都在3日龄时表达量达到最高；CchiOR10在雄成虫触角中的表达量低，且在不同日龄之间无显著差异。CchiOR8和CchiOR16均在5日龄雌成虫触角中表达量达到最高，而CchiOR39和CchiOR10在1日龄雌成虫触角中表达量显著高于其他日龄的。【结论】4个绿豆象CchiOR基因均在成虫触角中表达量较高，推测其在绿豆象嗅觉识别过程发挥重要作用。

来源：2023年第2期

《昆虫学报》期刊编辑部

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