昆虫学报

作者：胡颖,张文德,王思懿,张凯遥,任中民,吉挺,蔺哲广,赵红霞,陈大福,郭睿

单位：1. 福建农林大学动物科学学院蜂学学院, 福州 350002; 2. 福建省蜂疗研究所, 福州 350002;3. 扬州大学动物科学与技术学院, 江苏扬州 225000; 4. 广东省科学院动物研究所, 广州 510260

关键词：意大利蜜蜂,微小RNA,ame-miR-bantam,模拟物,抑制物,肠道,发育

【目的】本研究旨在通过饲喂法对意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica工蜂幼虫肠道中ame-miR-bantam进行过表达与敲减，明确ame-miR-bantam对靶基因USP和P300表达的调控作用。【方法】通过饲喂ame-miR-bantam模拟物(mimic-ame-miR-bantam)和抑制物(inhibitor-ame-miR-bantam)及相应的阴性对照mimic-NC-ame-miR-bantam和inhibitor-NC-ame-miR-bantam，对意大利蜜蜂工蜂4-6日龄幼虫肠道组织中的ame-miR-bantam分别进行过表达和敲减。利用生物信息学软件进行ame-miR-bantam的靶向预测及分析。通过RT-qPCR检测4-6日龄意大利蜜蜂工蜂幼虫肠道中ame-miR-bantam的过表达和敲减效果及靶基因USP和P300的相对表达量。【结果】相较于饲喂mimic-NC-ame-miR-bantam，饲喂mimic-ame-miR-bantam后，ame-miR-bantam在意大利蜜蜂4-6日龄工蜂幼虫肠道中均显著上调；相较于饲喂inhibitor-NC-ame-miR-bantam，饲喂inhibitor-ame-miR-bantam后，ame-miR-bantam在4日龄工蜂幼虫肠道中显著下调，在5日龄和6日龄工蜂幼虫肠道中下调表达。ame-miR-bantam共靶向222个基因，可注释到细胞进程等35个GO条目和Wnt信号通路等160条KEGG通路。相比于饲喂mimic-NC-ame-miR-bantam的阴性对照组，过表达ame-miR-bantam后，4日龄工蜂幼虫肠道中USP和P300的表达量均为上调；5日龄工蜂幼虫肠道中USP的表达量下调，P300显著下调表达；6日龄工蜂幼虫肠道中USP和P300均显著下调表达。相比于饲喂inhibitor-NC-ame-miR-bantam的阴性对照组，敲减ame-miR-bantam后，4和5日龄工蜂幼虫肠道中USP和P300的表达量均为上调；6日龄工蜂幼虫肠道中USP显著上调表达，P300的表达量上调。【结论】通过饲喂模拟物和抑制物能够分别实现意大利蜜蜂工蜂幼虫肠道中ame-miR-bantam的有效过表达和敲减；幼虫肠道中ame-miR-bantam可负调控USP和P300的表达。

来源：2022年第11期

《昆虫学报》期刊编辑部

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