昆虫学报

作者：李凯旋,李艳艳,王树娟,斯琴,张丽莹,庞保平

单位：1. 内蒙古农业大学草原昆虫研究中心, 呼和浩特 010020; 2. 呼和浩特市园林植保站, 呼和浩特 010030;3. 呼和浩特市成吉思汗公园, 呼和浩特 010010

关键词：桃小食心虫,气味结合蛋白,基因克隆,表达谱,生物信息学分析

【目的】桃小食心虫Carposina sasakii是我国北方落叶果树的重要蛀果害虫，一旦幼虫蛀入果内，便会对果实的品质产生影响。成虫期是控制此害虫发生为害的关键时期。气味结合蛋白(odorant binding protein, OBP)作为昆虫嗅觉感受系统中与气味分子结合的重要气味运转蛋白，在成虫寄主植物定位及交配行为中具有重要作用。本研究对桃小食心虫气味结合蛋白基因进行克隆、鉴定和成虫组织表达分析，以期为OBPs在桃小食心虫嗅觉感受过程中的功能研究奠定基础。【方法】基于前期获得的桃小食心虫转录组测序数据，选择在其雌雄成虫触角中相对高表达的5个OBP基因(CsasOBP7, CsasOBP12, CsasOBP15, CsasOBP19和CsasOBP21)。采用RACE技术克隆出这5个OBP基因cDNA全长序列，进行生物信息学分析；通过qRT-PCR技术检测这5个OBP基因在桃小食心虫不同发育阶段(1和5日龄卵、初孵幼虫、老熟幼虫和蛹)以及在刚羽化、交配高峰期的和交配后6 h的雌雄成虫不同组织［触角、头(不含触角)、胸、腹、足和翅］中表达量。【结果】获得桃小食心虫5个OBP基因CsasOBP7, CsasOBP12, CsasOBP15, CsasOBP19和CsasOBP21的全长cDNA序列(GenBank登录号: MZ476786-MZ476790)。其中CsasOBP19为一段C端不完整的Minus-C OBP，其余均属于完整的Classical OBPs，且均含有信号肽。系统发育分析表明，在桃小食心虫5个CsasOBPs中, CsasOBP7和CsasOBP19的亲缘关系最近。qRT-PCR结果表明，CsasOBP7和CsasOBP19均在桃小食心虫蛹期高表达，而CsasOBP12, CsasOBP15和CsasOBP21均在卵期高表达。从桃小食心虫成虫刚羽化、交配高峰直至交配后6 h，5个CsasOBP基因表达量总体呈下降趋势。在成虫刚羽化时，这5个CsasOBP基因在各组织中均有表达，且主要在雄虫组织中高表达；在成虫交配高峰期，这5个CsasOBP基因在雄虫触角中高表达，特别是CsasOBP7和CsasOBP15只在雄虫触角中特异性表达；在成虫交配后6 h，每个CsasOBP基因只特异性地高表达于1或2个组织中。【结论】桃小食心虫的这5个CsasOBP基因在成虫交配高峰期雄虫触角中高表达，意味着这些CsasOBP基因可能在雄虫寻找雌虫过程中发挥着重要作用。

来源：2022年第11期

《昆虫学报》期刊编辑部

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