昆虫学报

作者：张冰,王艺,李娜,李丹丹,阚云超

单位：1. 南阳师范学院, 河南省伏牛山昆虫生物学重点实验室, 昆虫生物反应器河南省工程实验室, 河南南阳 473061;2. 河南大学生命科学学院, 河南开封 475004

关键词：家蚕,生存素,组织表达；H3Ser10ph,有丝分裂,BmN4细胞

【目的】阐明生存素基因在家蚕Bombyx mori BmN4细胞有丝分裂中的功能。【方法】qRTPCR分析家蚕生存素基因BmSurvivin在家蚕5龄第3天幼虫不同组织(丝腺、中肠、马氏管、精巢、卵巢、脂肪体、皮细胞层和表皮)中的表达量；构建pIZT/V5-His-BmSurvivin-GFP (BG)融合载体并转染BmN4细胞，以免疫荧光标记检测BmSurvivin和第10位丝氨酸(Ser10)磷酸化的组蛋白H3(H3Ser10ph)在BmN4细胞有丝分裂分裂不同时期的定位。【结果】BmSurvivin在家蚕5龄第3天幼虫马氏管中表达量最高，其次是在丝腺和中肠中。成功构建pIZT/V5-His-BmSurvivin-GFP载体。免疫荧光结果显示，在BmN4细胞间期核中可以看到明显的GFP信号，涵盖了细胞核和细胞质区域，指示BmSurvivin的定位；随着细胞进入分裂期，GFP信号指示BmSurvivin与染色质共定位，待细胞形成明显的双取向时在纺锤体区域也可以看到GFP信号；后期随着姐妹染色单体分开，GFP信号指示BmSurvivin定位在染色质及胞质分裂区；末期随着两个新的子细胞形成GFP信号指示BmSurvivin仅定位在胞质分裂区。H3Ser10ph定位在BmN4细胞前中期染色质凝缩处，至中期信号最强，与整条染色体重合，后期信号消失。【结论】BmSurvivin与有丝分裂周期中染色质和纺锤体的动态变化相关。

来源：2022年第5期

《昆虫学报》期刊编辑部

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