昆虫学报

作者：祝智威,王杰,隆琦,许雅静,冯睿蓉,刘佳美,赵浩东,朱乐冉,侯海青,陈大福,郭睿

单位：1. 福建农林大学动物科学学院蜂学学院, 福州 350002; 2. 福建农林大学蜂疗研究所, 福州 350002

关键词：意大利蜜蜂,幼虫,肠道,微小RNA,ame-miR-13b,靶基因

【目的】微小RNA(microRNAs, miRNAs)在昆虫的繁殖、发育和免疫等重要生命活动的调控过程中扮演关键角色。本研究旨在探究在意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica幼虫个体水平过表达与敲减ame-miR-13b对其靶基因表达的影响，为深入探究ame-miR-13b调控意大利蜜蜂幼虫肠道发育的分子机理提供理论和实验依据。【方法】根据ame-miR-13b的核苷酸序列设计合成相应的模拟物mimic-ame-miR-13b和抑制物inhibitor-ame-miR-13b及其对照mimic-NC和inhibitor-NC，混入饲料后饲喂意大利蜜蜂3日龄幼虫，每12 h更换一次饲料，连续饲喂6次，以分别过表达和敲减ame-miR-13b；通过RT-qPCR检测过表达和敲减ame-miR-13b后意大利蜜蜂幼虫肠道中ame-miR-13b及其靶基因Ecr, Egfr和P450 18a1的表达量。【结果】与mimic-NC饲喂组相比, mimic-ame-miR-13b饲喂组中ame-miR-13b在意大利蜜蜂4和6日龄幼虫肠道中均显著上调表达；与饲喂inhibitor-NC组相比，inhibitor-ame-miR-13b饲喂组中ame-miR-13b在4日龄幼虫肠道中下调表达，在5和6日龄幼虫肠道中显著下调表达。与mimic-NC饲喂组相比，过表达ame-miR-13b组中意大利蜜蜂6日龄幼虫肠道中Egfr的表达量显著降低，而Ecr和P450 18a1的表达量均显著升高。与inhibitor-NC饲喂组相比，敲减ame-miR-13b组中意大利蜜蜂6日龄幼虫肠道中Egfr上调表达但不显著，Ecr显著上调表达，而P450 18a1显著下调表达。【结论】通过饲喂法在意大利蜜蜂幼虫个体中成功实现了miRNA的过表达和敲减；ame-miR-13b与Egfr之间存在潜在的负调控关系。

来源：2022年第4期

《昆虫学报》期刊编辑部

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