昆虫学报

作者：郑树壕,司玉晓,闫祺,郭慧芳,董双林

单位：1. 南京农业大学植物保护学院, 农作物生物灾害综合治理教育部重点实验室, 南京 210095; 2. 江苏省农业科学院植物保护研究所, 南京 210014

关键词：草地贪夜蛾,劳氏粘虫,信息素结合蛋白,原核表达,荧光竞争结合

【目的】测定草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda 3个信息素结合蛋白(pheromone binding protein, PBP)(SfruPBP)对草地贪夜蛾及同域近缘种劳氏粘虫Leucania loreyi性信息素及腺体组分的结合特性，探究草地贪夜蛾这3个SfruPBPs在两种昆虫不同性信息素组分识别中的作用。【方法】以pET-30a(+)为载体分别构建草地贪夜蛾3个SfruPBPs的原核表达质粒，导入大肠杆菌Escherichia coli并培养至OD600=0.6~0.8后，加入IPTG进行这3个SfruPBPs的诱导表达，采用Ni-NTA琼脂糖磁珠进行蛋白纯化；利用荧光竞争结合实验测定这3个SfruPBPs与草地贪夜蛾和劳氏粘虫的共14种性信息素和腺体组分的结合特性。【结果】原核表达获得SfruPBP1-3重组蛋白，进一步纯化后电泳检测得到单一且预期大小的目的蛋白。荧光竞争结合实验测定发现，在草地贪夜蛾和劳氏粘虫已报道的总计14种性信息素和腺体组分中，SfruPBP1对这两种害虫的性信息素主组分Z9-14∶Ac特异性强结合，Ki=0.80 μmol/L；SfruPBP2结合谱较广，除对性信息素次要组分Z7-12∶Ac及腺体组分12∶Ac, E7-12∶Ac和Z10-14∶Ac强结合(Ki<1.00 μmol/L)外，还对性信息素主组分Z9-14∶Ac及腺体组分Z9-12∶Ac和11-12∶Ac具中等结合能力(1.00 μmol/L

来源：2022年第3期

《昆虫学报》期刊编辑部

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