昆虫学报

作者：彭竹,黄丽,赵淑果,吕建华,赵慧婷

单位：山西农业大学生命科学学院, 山西太谷 030801

关键词：中华蜜蜂,气味结合蛋白,蛋白纯化,气味化合物,荧光竞争结合实验

【目的】气味结合蛋白(odorant binding proteins, OBPs)在昆虫寄主定位、产卵地选择等行为中发挥着重要作用，明确中华蜜蜂Apis cerana cerana AcerOBP14与配体的结合特性有助于阐明中华蜜蜂嗅觉识别的分子机制。【方法】通过qRT-PCR测定OBP14在20日龄中华蜜蜂成年工蜂、20日龄中华蜜蜂成年雄蜂、中华蜜蜂采粉蜂和意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica采粉蜂触角中的表达量。构建原核表达载体pET28a/AcerOBP14，表达并分离纯化重组蛋白AcerOBP14。利用荧光竞争结合实验检测AcerOBP14与37 种气味配体化合物的结合特性。【结果】qRT-PCR分析发现， OBP14在中华蜜蜂采粉蜂触角中的表达量极显著高于20日龄中华蜜蜂成年工蜂和雄蜂以及意大利蜜蜂采粉蜂中的。荧光竞争结合实验表明，AcerOBP14与蜂王信息素、告警信息素、那氏信息素及多种植物挥发物都具有结合能力，其中与β罗勒烯的结合能力最强，解离常数 Ki=0.297 μmol/L。【结论】AcerOBP14的配体结合谱较宽，暗示其可能参与了中华蜜蜂的多种生理行为反应，且在中华蜜蜂的采粉行为中发挥着重要作用。

来源：2021年第2期

《昆虫学报》期刊编辑部

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