昆虫学报

作者：赵星月,陈建斌,王曙光,张晓林,穆野,魏辉,赵立华,陈永对,郑雪,陈勇,郑立敏,张洁

单位：1. 西南林业大学生命科学学院, 昆明 650224; 2. 云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所, 云南省农业生物技术重点实验室,农业部西南作物基因资源与种质创制重点实验室, 昆明 650205; 3. 湖南省农业科学院植物保护研究所, 长沙 410125;4. 福建省农业科学院植物保护研究所, 福建省作物有害生物监测与治理重点实验室,农业部福州作物有害生物科学观测试验站, 福州 350003

关键词：西花蓟马,酵母双杂交,番茄环纹斑点病毒,NSs蛋白,VDAC

【目的】筛选鉴定西花蓟马Franiklinella ocicdentalis体内与番茄环纹斑点病毒(tomato zonate spot virus, TZSV)NSs蛋白互作的介体因子。【方法】利用酵母双杂交技术筛选与TZSV NSs互作的西花蓟马蛋白;进行序列分析鉴定后，将捕获的蛋白与NSs基因回转到酵母细胞，利用营养缺陷型培养基鉴定蛋白互作情况。再利用GST Pull-down技术验证TZSV NSs与鉴定出的西花蓟马蛋白的体外互作关系。【结果】构建了TZSV NSs的酵母双杂交诱饵质粒pGBKT7-NSs，确定了诱饵质粒对酵母AH109细胞无毒性，并且无自激活活性。序列分析发现与TZSV NSs互作的西花蓟马蛋白为类电压依赖性阴离子通道(voltage-dependent anion-selective channel-like, VDAC)。酵母回转实验显示TZSV NSs与西花蓟马VDAC在酵母细胞内存在特异性互作。GST Pull-down结果表明TZSV NSs与西花蓟马VDAC在体外存在相互作用。【结论】通过酵母双杂交和GST Pull-down技术，分别在酵母细胞内和体外证实了TZSV NSs和西花蓟马VDAC存在特异性互作。这些结果有助于揭示西花蓟马VDAC蛋白调控西花蓟马持久传毒的机制，为虫传病毒病的防治提供理论基础。

来源：2020年第6期

《昆虫学报》期刊编辑部

查看昆虫学报杂志2020年第6期